Онкоскрининг направлен на выявление рисков развития, раннее выявление, а также контроль результативности лечения лимфопролиферативных заболеваний.
задать вопрос
Онкоскрининг лимфатической системы рекомендован всем совершеннолетним лицам, учитывая неизвестность достоверных причин этой группы онкопатологий.
Однако есть группы риска, лица входящие в которые, должны максимально внимательно относиться к собственному здоровью. В эти категории включены люди со следующими потенциальными триггерами:
- онкологическое заболевание в любой форме у близких родственников;
- проживание в неблагоприятной экологической обстановке или работа на вредном производстве;
- алкогольная либо никотиновая зависимость как в настоящем, так и в прошлом;
- возраст старше 40 лет, когда активность противораковой защиты организма ослабевает.
Состав программы
Онкоскрининг на лимфопролиферативные заболевания подразумевает анализ крови на следующие вещества:
- ЛДГ (лактатдегидрогеназа). Это фермент, который присутствует практически во всех клетках организма. Повышение концентрации указывает на процесс тканевого разрушения неуточненной локализации. Однако в комплексе с другими лабораторными и инструментальными исследованиями позволяет достоверно выявлять инфаркт легкого, мышечную дистрофию и гемолитическую болезнь, что нередко сопутствует лимфопролиферативной патологии.
- Бета-2-микроглобулин. Вещество белковой природы, которое присутствует на поверхности практически всех клеточных мембран. Его концентрация в крови возрастает на фоне лейкемии, миеломы, лимфомы, а также заболеваний воспалительной природы.
Результат обследования
Исполнение анализа занимает 1-2 дня. Пациент получает протокол скрининга с показателями онкомаркеров. При отклонении значений от нормы человеку необходимо обратиться к врачу.
Результаты онкоскрининга на лимфопролиферативные заболевания нельзя считать поводом для постановки диагноза, поскольку определяются показатели неспецифичных соединений.
Отклонение значений онкомаркеров от нормы является веским аргументом для проведения углубленного обследования, состоящего из ряда лабораторных тестов и инструментальных методов.
Консультация врача-онколога (первичная) | 1 950 руб. |
Консультация врача-онколога (повторная) | 1 700 руб. |
Лабораторный онкоскрининг лимфопролиферативных заболеваний | 1 200 руб. |
Профилактика и ранняя диагностика злокачественных новообразований
Ущерб, наносимый обществу онкологическими заболеваниями, колоссален.
Во всем мире отмечается увеличение частоты случаев возникновения рака и высокий уровень смертности от него, В развитых странах наблюдается тенденция к замедлению и снижению смертности от злокачественных новообразований (далее — ЗНО) за счет эффективно работающих профилактических программ и улучшения методик раннего выявления рака. К сожалению, более половины регистрируемых онкологических заболеваний имеет распространенную стадию заболевания.
На сегодняшний день показатель активного выявления ЗНО не соответствует возможностям медицины.
Борьба за рано выявленные ЗНО — это борьба за сохранение жизни, социальной активности граждан, а так же за экономию средств на лечение, которые ежегодно составляют значительные финансовые расходы.
Онкологические заболевания отнесены в группу социально значимых болезней. На первом году жизни с момента установления диагноза практически умирает каждый третий человек. Естественно, на демографический процесс влияет как рост заболеваемости, так и уровень смертности, что связано с постарением населения.
В структуре общей смертности второе место после заболеваний сердечно-сосудистой системы занимает смертность от ЗНО. Приходится констатировать, что большинство выявленных онкологических заболеваний имеют распространенную стадию заболевания и требуют дорого-стоящего комплексного лечения, в результате которого людей ожидает инвалидность и изоляция от общества.
Более половины из впервые зарегистрированных пациентов со злокачественными новообразованиями выявляются с распространенными и запущенными процессами, что свидетельствует о необходимости более активной реализации скрининговых программ.
Тест и периодичность его проведения | Возраст | |
Рак шейки матки | Гинекологический осмотр 1 раз в 1-2 года | с 18 лет |
Тест Папаниколау 1 раз в 2 года | с 18 до 65 | |
УЗИ органов малого таза (шейки матки, тала матки, яичника) 1 раз в 2 года | с 25 лет | |
Рак молочной железы | Самообследование (пальпация молочных желез и аксилярных лимфатических узлов) 1 раз в месяц | с 18 лет |
Клиническое обследование | с 25 лет | |
Маммография 1 раз в 2 года | с 40 до 70 | |
УЗИ 1 раз в 2 года | с 25 до 39 | |
Колоректаль-рак | Пальцевое ректальное исследование | с 40 лет |
Иммуноферментный анализ кала на скрытую кровь 1 раз в 2 года | с 40 лет | |
Ректороманоскопия и/или сигмоскопия 1 раз в 3 года | с 40 лет | |
Колоноскопия 1 раз в 3 года | с 40 лет | |
Рак простаты | Пальцевое ректальное исследование 1 раз в год | с 45 до 70 лет |
Определение в крови уровня ПСА 1 раз в 3 года | с 45 до 70 лет | |
Трансректальное УЗИ простаты 1 раз в 3 года | с 45 до 70 лет |
Показатель выживаемости всегда выше у тех больных с ЗНО, которым диагноз поставлен в результате скрининга, а не в результате обращения к врачу из-за появления симптомов заболевания.
В скрининговые программы чаще попадают пациенты с менее агрессивными формами рака и, соответственно, с лучшей выживаемостью.
Больные с быстро прогрессирующими формами рака чаще обращаются к врачу в связи с появлением симптомов.
Выявление ранних форм рака имеет наибольшую эффективность при локализациях, лидирующих не только по частоте заболеваемости, но и по темпам прироста заболеваемости и занимающих первые места по смертности от ЗНО (рак легкого, рак молочной железы, рак желудка, рак толстой и прямой кишки, рак яичников). Следует обратить внимание на тот факт, что скрининг относится к мероприятиям вторичной профилактики рака.
До 65,0% возникновение рака можно предотвратить, а соответственно снизить смертность от ЗНО.
Более двух третей случаев возникновения рака могут быть связаны с несбалансированным питанием, вредными привычками, низкой физической активностью и другими особенностями стиля жизни, исправить которые под силу самому человеку. Люди, как правило, склонны недооценивать риск потерять здоровье.
Хотя здоровый образ жизни не может гарантировать полное отсутствие вероятности развития онкологического заболевания у человека, но у людей, выбравших здоровый образ жизни, снижен риск развития заболевания.
Питание может приносить и пользу, и вред. В развитых странах отмечается резкое снижение рака желудка, что объясняется совершенствованием технологий замораживания пищевых продуктов и реже использование нитратов, соли в качестве консервантов, а также употребление свежих овощей.
Основными воздействующими факторами на развитие клеток являются: избыточное употребление сахара, продуктов из белой муки (стимулирует рост клеток), избыточное употребление жирных кислот ОМЕГА — 6 (маргарин, растительные масла, животный жир, яйцо и другие), контакт с химикатами, воздействие электромагнитных полей, мобильных телефонов.
Самой распространенной и самой опасной привычкой является курение. О вреде курения люди знают практически все, но, тем не менее, они продолжают курить. Уже установлена связь между возникновением целого ряда опухолей и курением табака.
Уровень заболеваемости раком легкого более чем в 20 раз выше среди курящих мужчин и в 12 раз выше среди курящих женщин, по сравнению с людьми никогда не курившими.
Установлено, что курение в 90% соответственно за возникновение рака легкого, с этим же фактором связывают более высокую заболеваемость раком полости рта, глотки, гортани, пищевода, шейки матки, мочевого пузыря.
Курящему человеку не стоит обольщаться мыслью, что своей вредной привычкой он вредит лишь своему здоровью. В воздухе вокруг курящего содержится 40 веществ, которые причастны к возникновению рака и у другого человека. Особенно страдают дети курящих родителей, у таких детей повышенный риск возникновения злокачественных лимфом.
Спиртные напитки по своей канцерогенной силе и свойствам приближаются к табаку. Вместе с табаком их можно назвать самым мощным орудием самоубийства.
Еще одна самая распространенная привычка — загорать. Ультрафиолетовое излучение может явиться причиной возникновения рака кожи и меланом.
Физическая активность вносит свою лепту в снижение риска развития рака. Существуют убедительные данные, что регулярные физические нагрузки связаны с понижением риска развития колоректального рака, рака молочной железы, тела матки и предстательной железы.
Образ жизни, включающей здоровое питание, физические упражнения и контроль веса, полезен людям не только для профилактики рака, но также и других серьезных заболеваний. Знание факторов риска развития ЗНО, несомненно, чрезвычайно важно в плане для поиска средств точного удара первичной профилактики.
Однако нередко для раннего выявления опухолей визуальных локализаций не требуется специального инструментария и специальных знаний врачей неонкологических специальностей. Эти локализации доступны для осмотра и достаточно только умозаключении и выводов для подозрения существования новообразований.
Рак кожи и меланома
Занимают 2 место в структуре заболеваемости ЗНО, чаще поражаются открытые участки кожных покровов.
Факторы риска: необычные родинки, белая кожа, веснушки и светлые волосы, избыточное воздействие ультрафиолетового излучения и загар, возраст. Меланома является одной из наиболее частых опухолей у людей моложе 30 лет.
Профилактика меланомы и рака кожи:
- защита лица и шеи от интенсивного и длительного солнечного облучения, особенно у пожилых люден со светлой, плохо поддающейся загару кожей;
- регулярное применение питательных кремов с целью предупреждения сухости кожи;
- радикальное излечение длительно незаживающих язв и свищей;
- защита рубцов от механических травм;
- строгое соблюдение мер личной гигиены при работе со смазочными материалами и веществами, содержащими канцерогены;
- своевременное излечение предраковых заболеваний кожи;
- регулярный осмотр кожи, но особое внимание родинкам.
- Пациентам с факторами риска ежегодное обследование у специалиста.
- Рак молочной железы
- Занимает 1 место в структуре заболеваемости женского населения.
- Факторы риска: возраст старше 40 лет; отсутствие родов, грудного вскармливания, первые роды после 30 лет; аборты; рак молочной железы у кровных родственников; доброкачественные заболевания молочной железы; травмы молочной железы; раннее наступление менструации (до 12 лет); позднее наступление менопаузы (после 55 лет); ожирение; ионизирующее излучение; ухудшение экологии; низкая физическая активность; гинекологические заболевания, заболевания щитовидной железы и печени; хронические стрессы.
- Профилактика рака молочной железы включает в себя несколько компонентов:
- профилактика избыточного веса, а именно умеренное питание;
- питание е преимущественным употреблением растительных продуктов, рыбы и других морепродуктов и умеренном употреблении продуктов животного происхождения;
- умеренное употребление алкогольных напитков;
- ограничение применение (под контролем врача) гормонозаместителышй терапии, приоритетным направлением является ранняя диагностика и скрининг.
- Рак шейки матки (РШМ)
- Занимает 5 место в структуре заболеваемости женского населения.
- Факторы риска: ранняя сексуальная жизнь, инфицирование и прежде всего вирусом папилломы человека (ВПЧ), частые аборты, курение.
Первичная профилактика РШМ — это система мер по выявлению факторов риска и их устранению. Это, естественно, пропаганда здорового образа жизни, повышение образования населения, борьба с курением и алкоголем, использование барьерных методов контрацепции, профилактика выявления факторов риска распространения ин-фекций, передающихся половым путем, внедрение профилактических вакцин.
Вторичная профилактика РШМ — это цитологический скрининг по обследованию всех женщин с целью выявления и своевременного лечения изменений шейки матки. Результаты скрннингового обследования женщин дают возможность формировать группы риска и наблюдать за ними.
Несомненно, выделение групп риска позволяет расширить эффективность ранней диагностики РШМ.
Широкое внедрение профилактических и екрининговых программ позволило значительно снизить заболеваемость и смертность от РШМ за счет своевременного выявления и адекватного лечения предопухолевых состояний шейки матки.
- Колоректальный рак
- Занимает 6 место в структуре заболеваемости ЗНО.
- Факторы риска: семейный аденоматозный полипоз толстой и прямой кишки, хронические воспалительные заболевания толстой кишки, несбалансированное питание с высоким содержанием жира, избыточный вес, физическая пассивность, диабет, курение и алкоголь.
В лаборатории нашей поликлиники проводится анализ кала на скрытую кровь.В лаборатории поликлиники железнодорожников — анализ кала на гемоглобин и трансферрин ,что позволяет предположить локализацию опухоли в верхнем или нижнем отделах кишечника.
Профилактика; ограничить потребление продуктов с высоким содержанием жира и углеводов. В рацион преимущественно включать больше овощей и фруктов и продуктов из зерна грубого помола. Избегать избыточного веса. Не злоупотреблять алкоголем и курением, повышенная физическая активность.
Рак желудка
Занимает 4 место в структуре заболеваемости ЗНО.
Факторы риска: бактериальная инфекция. В последние годы большое внимание уделяется особой инфекции желудка — хеликобактерио-зу, вызываемому бактериями Helicobacter pylori.
Повышенный риск рака желудка отмечен у людей, потребляющих мало животных белков, свежей зелени и микроэлементов, но большое количество копченых продуктов, соленой рыбы и мяса, маринованных овощей и пищи богатой крахмалом и бедной клетчаткой.
Курение удваивает риск рака желудка. Раннее перенесенные операции на желудке, некоторые виды полипов желудка.
Профилактика: изменить структуру питания — повышенное употребление овощей, фруктов, рыбы, растительных жиров, снижение употребления колбас, копченых и соленых продуктов, мяса.
Отказ от курения и уменьшение до умеренною потребления спиртных напитков. Соблюдение соответственных гигиенических правил, направленных на профилактику инфицирования Helicobacter pylori.
В случае обнаружения инфекции -проведение антибактериальной терапии.
Рак предстательной железы (РПЖ)
Занимает 3 место в структуре заболеваемости мужского населения. За 10 лет заболеваемость РПЖ увеличилась на 142,5%.
Факторы риска: возраст (средний возраст заболевших 70-73 года), ожирение, физическая пассивность.
Профилактика: избегать избыточного веса, повышенная физическая активность и проведение скрининга:
- пальцевое ректальное исследование 1 раз в год с 45 до 70 лет.
- определение в крови уровня ПСА 1 раз в 3 года с 45 до 70 лет.
- трансректальное УЗИ простаты 1 раз в 3 года с 45 до 70 лет.
Рак легкого
Занимает 1 место в структуре заболеваемости ЗНО всего населения. Факторы риска; курение и состояние экологии.
Профилактика: отказ от курения является главным и наиболее эффективным методом профилактики. Запрет курения в общественных местах, т.е. профилактика пассивного курения, служит дополнительной и очень важной мерой профилактики рака легкого.
Флюорографический скрининг является единственным методом на сегодняшний день в плане ранней диагностики рака легкого.
Таким образом, первичная профилактика является приоритетным направлением противораковой борьбы.
Эффективность первичной профилактики в снижении смертности от злокачественных новообразований, причины которых известны, не вызывает сомнения.
В первую очередь это касается злокачественных опухолей, непосредственной причиной которых является курение — рака органов полости рта, пищевода, поджелудочной железы, гортани, легкого, мочевою пузыря и др.
Модификация питания в сторону употребления свежих овощей и фруктов, снижения уровня калорийности пищи, повышение физической активности и соответственно снижение массы тела приведут к снижению заболеваемости и смертности от рака желудка, толстой кишки, молочной железы, тела матки, предстательной железы, а так же снижение риска других опухолей.
Профилактика инфекционных канцерогенных воздействий, выявление и лечение инфекций, и вакцинация против известных инфекционных агентов являются наиболее эффективным методом контроля таких злокачественных опухолей, как рак шейки матки, рак печени, некоторые формы лейкозов и лимфом, рак желудка и др.
Снижение воздействия на человека канцерогенных факторов на производстве, в атмосферном воздухе, так же приведет к снижению риска злокачественных опухолей. И наконец, не вызывает сомнения необходимость контроля за воздействием па человека ультрафиолетовых лучей, которые вызывают рак и меланому кожи.
- Вторичная профилактика, скрининг или преклиническая диагностика показана для злокачественных опухолей, при которых доказана эффективность скрининга: цитологический скрининг РШМ, маммографический скрининг РМЖ, на колоректалышй рака — пальцевое ректальное исследование, ректороманоскопия или симгмоскопия, колоноскопия, иммуноферментный анализ кала на скрытую кровь, определение простато-специфического антигена (ПСА) на наличие патологии простаты, флюорографический скрининг.
- Наряду с организованным скринингом населения важное значение для ранней и преклинической диагностики имеет информированность населения о необходимости регулярных профилактических осмотров, а так же участие во всеобщей диспансеризации населения.
- Каждый человек должен знать некоторые признаки, при наличии которых необходимо срочно обратиться к врачу:
- Беспричинная слабость, похудание.
- Появление опухоли, уплотнения или не заживающего изъязвления в любой части тела.
- Изменение цвета, увеличение размера, кровоточивость и зуд бородавок и родинок.
- Затруднение при глотании пищи.
- Стойкие запоры.
Ранняя диагностика рака
Злокачественные опухоли являются одной из самых актуальных проблем современной медицины. Успех их лечения во многом зависит от стадии процесса. Чем раньше выявлена опухоль, тем более благоприятным будет прогноз.
Однако большинство онкологических заболеваний не проявляют себя на начальных стадиях, а когда первые симптомы уже появились, то предстоящее лечение будет уже не так эффективно.
Для того чтобы избежать подобных проблем, были разработаны методы ранней диагностики рака.
Кому нужно проходить обследование?
Злокачественные опухоли могут появиться у любого человека независимо от его пола, профессии, социального статуса, уровня дохода. Проходить регулярное обследование с целью ранней диагностики рака могут все, кто заботится о своем здоровье. Специалисты выделили определенные факторы, которые могут увеличивать риск развития опухолей. К ним относятся:
- случаи онкологических заболеваний у близких родственников;
- проживание в местности с неблагоприятной экологической обстановкой;
- работа с канцерогенными веществами химической, физической или биологической природы;
- наличие доброкачественных опухолей, которые имеют риск перерождения в злокачественные;
- вредные привычки (злоупотребление алкоголем, курение);
- подтвержденный диагноз ВИЧ-инфекции.
Ранняя диагностика рака у этих категорий людей особенно актуальна. Им рекомендуется проходить обследование не реже, чем раз в год, а лучше два раза. Это поможет выявить опухоль и эффективно вылечить ее.
Какие методы применяются для ранней диагностики рака?
Существует большое число анализов и исследований, которые помогут выявить злокачественные опухоли.
- Генетическое тестирование. Позволяет найти изменения в генах, которые присущи для той или иной опухоли. Данный метод помогает выявить предрасположенность к заболеванию, когда оно еще не развилось. При положительном результате тестов можно разработать план профилактики и регулярно проходить обследование.
- Онкомаркеры. Могут повышаться при развитии опухолевого процесса. Ранняя диагностика по онкомаркерам зависит от локализации опухоли. Например, для выявления рака простаты определяют уровень ПСА, для яичников — СА 125 и т. д.
- Инструментальное обследование. Включает в себя такие методы ранней диагностики рака, как рентген, УЗИ, МРТ, КТ, ПЭТ-КТ, эндоскопическое исследование. Для каждого органа применяется определенный способ, возможно их сочетание. Например, ранняя диагностика рака почек может включать в себя УЗИ органов брюшной полости, МРТ, урографию.
У каждого из описанных выше методов ранней диагностики рака имеются как достоинства, так и недостатки — ни один из них не может гарантировать абсолютную точность результатов. Для того чтобы получить достоверную информацию, рекомендуется проходить комплексное обследование, которое будет различным для каждого вида опухоли.
Например, ранняя диагностика рака молочной железы может включать в себя выявление мутаций в генах BRCA1 и BRCA2, регулярное прохождение маммографии и/или УЗИ, а также определение в крови уровня онкомаркера СА 15-3. Составить индивидуальный план ранней диагностики рака других локализаций можно после консультации с врачом.
Диагностика инфекционных заболеваний
Диагностика инфекционных заболеваний является одной из самых сложных проблем в клинической медицине. Лабораторные методы исследования при ряде нозологических форм играют ведущую, а в целом ряде клинических ситуаций решающую роль не только в диагностике, но и в определении конечного исхода заболевания.
Диагностика инфекционных заболеваний почти всегда предусматривает использование комплекса лабораторных методов. Сеть независимых лабораторий «Ситилаб» в своей работе для диагностики инфекционных заболеваний использует 3 группы специальных лабораторных методов исследования:
- бактериологические;
- серологические;
- метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для обнаружения ДНК или РНК возбудителя инфекционного заболевания в исследуемом материале.
У одних пациентов для диагностики этиологии инфекционно-воспалительного процесса достаточно провести бактериологическое исследование, в других клинических ситуациях решающее значение имеют данные серологических исследований, в третьих, предоставить полезную информацию может только метод ПЦР. Однако наиболее часто в клинической практике врачу-клиницисту необходимо использовать данные различных методов лабораторных исследований.
Бактериологические методы исследования
Бактериологические исследования наиболее часто проводят при подозрении на гнойно-воспалительные заболевания (составляют 40-60% в структуре хирургических заболеваний) с целью их диагностики, изучения этиологической структуры, определения чувствительности возбудителей к антибактериальным препаратам. Результаты бактериологических анализов способствуют выбору наиболее эффективного препарата для антибактериальной терапии, своевременному проведению мероприятий для профилактики внутрибольничных инфекций.
Возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний являются истинно-патогенные бактерии, но наиболее часто условно-патогенные микроорганизмы, входящие в состав естественной микрофлоры человека или попадающие в организм извне.
Истинно-патогенные бактерии в большинстве случаев способствуют развитию инфекционного заболевания у любого здорового человека.
Условно-патогенные микроорганизмы вызывают заболевания преимущественно у людей с нарушенным иммунитетом.
Бактериологические исследования при заболеваниях, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, направлены на выделение всех микроорганизмов, находящихся в патологическом материале, что существенно отличает их от аналогичных исследований при заболеваниях, вызванных истинно патогенными микроорганизмами, когда проводится поиск определенного возбудителя.
Для получения адекватных результатов бактериологического исследования при гнойно-воспалительных заболеваниях особенно важно соблюдать ряд требований при взятии биоматериала для анализа, его транспортировки в лабораторию, проведения исследования и оценки его результатов.
Для идентификации вида возбудителя гнойно-воспалительных заболеваний и определения чувствительности к антибактериальным препаратам бактериологические лаборатории используют комплекс методов. Они включают:
- микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия) из доставленного биоматериала;
- выращивание культуры микроорганизмов (культивирование);
- идентификацию бактерий;
- определение чувствительности к антимикробным препаратам и оценку результатов исследования.
Доставленный в бактериологическую лабораторию биоматериал первоначально подвергается микроскопическому исследованию.
Микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия), окрашенного по Граму или другими красителями, проводят при исследовании мокроты, гноя, отделяемого из ран, слизистых оболочек (мазок из цервикального канала, зева, носа, глаза).
Результаты микроскопии позволяют ориентировочно судить о характере микрофлоры, ее количественном содержании и соотношении различных видов микроорганизмов в биологическом материале, а также дают предварительную информации об обнаружении этиологически значимого инфекционного агента в данном биоматериале, что позволяет врачу сразу начать лечение (эмпирическое). Иногда микроскопия позволяет выявить микроорганизмы, плохо растущие на питательных средах. На основании данных микроскопии проводят выбор питательных сред для выращивания микробов, обнаруженных в мазке.
Культивирование микроорганизмов. Посев исследуемого биоматериала на питательные среды производят с целью выделения чистых культур микроорганизмов, установления их вида и определения чувствительности к антибактериальным препаратам. Для этих целей используют различные питательные среды, позволяющие выделить наибольшее количество видов микроорганизмов.
Оптимальными являются питательные среды, содержащие кровь животного или человека, а также сахарный бульон, среды для анаэробов. Одновременно производят посев на дифференциально-диагностические и селективные (предназначенные для определенного вида микроорганизмов) среды.
Посев осуществляют на стерильные чашки Петри, в которые предварительно заливают питательную среду для роста микроорганизмов.
Микроскопия мазков, окрашенных по Граму
1 — стрептококки; 2 — стафилококки; 3 — диплобактерии Фридленда; 4 — пневмококки
Чашки Петри с посевами инкубируют в термостате при определенных температурных, а для ряда микроорганизмов газовых (например, для выращивания анаэробов создают условия с низким содержанием кислорода) режимах в течение 18-24 часов. Затем чашки Петри просматривают.
Количественную обсемененность доставленного биоматериала микрофлорой определяют по числу колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл или 1 мг исследуемого образца. При просмотре чашек Петри выявляют некоторые особенности изменения цвета среды, ее просветления в процессе роста культуры.
Многие группы бактерий образуют характерные формы колоний, выделяют пигменты, которые окрашивают колонии или среду вокруг них. Из каждой колонии делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют.
Оценивают однородность бактерий, форму и размер, наличие спор или других включений, капсулы, расположение бактерий, отношение к окраске по Граму. Вся эта информация служит важнейшей составляющей для выбора сред и получения в дальнейшем чистой культуры каждого микроорганизма.
Колонии отсевают на плотные, жидкие, полужидкие питательные среды, оптимальные для культивирования определенного вида бактерий.
Выделенные чистые культуры микроорганизмов подвергают дальнейшему изучению в диагностических тестах, основанных на морфологических, ферментативных, биологических свойствах и антигенных особенностях, характеризующих бактерий соответствующего вида или варианта.
Идентификация — это комплекс бактериологических методов изучения бактерий, позволяющий определить вид микроорганизма.
В Лаборатории «Ситилаб» идентификация большинства видов бактерий и грибов осуществляется на автоматическом бактериологическом анализаторе с использованием диагностических панелей зарубежного производства: на бланке результата исследования в виде наименования микроорганизма или его рода, например, Streptococcus pneumoniae (пневмококк) или Eschrichia coli (кишечная палочка).
Определение чувствительности к антибактериальным препаратам. Чувствительность к антимикробным препаратам изучают у выделенных чистых культур микроорганизмов, имеющих этиологическое значение для данного заболевания.
Поэтому в направлении на бактериологические анализы требуется указать диагноз заболевания у больного. Определение чувствительности бактерий к спектру антибиотиков помогает лечащему врачу правильно выбрать препарат для лечения больного.
В Лаборатории «Ситилаб» определение чувствительности выделенной чистой культуры большинства видов бактерий и грибов осуществляется на автоматическом бактериологическом анализаторе с использованием диагностических панелей зарубежного производства к широкому спектру современных антибактериальных препаратов (от 6 до 32 препаратов, в зависимости от выделенного микроорганизма) с определением минимальной ингибирующей концентрации (МИК). На бланке результатов определения чувствительности к антибактериальным препаратам обозначение R указывает на резистентность, I — умеренную чувствительность, S — чувствительность микроорганизма к данному препарату.
Оценка результатов исследования. Принадлежность условно-патогенных микроорганизмов к естественной микрофлоре организма человека создает ряд трудностей при оценке их этиологической роли в развитии гнойно-воспалительных заболеваний.
Условно-патогенные микроорганизмы могут представлять нормальную микрофлору исследуемых жидкостей и тканей или контаминировать их из окружающей среды. Поэтому для правильной оценки результатов бактериологических исследований необходимо знать состав естественной микрофлоры изучаемого образца.
В тех случаях, когда исследуемый биоматериал в норме стерилен, как, например, спинномозговая жидкость, экссудаты, все выделенные из него микроорганизмы могут считаться возбудителями заболевания.
В тех случаях, когда исследуемый материал имеет собственную микрофлору, как, например, отделяемое влагалища, кал, мокрота, нужно учитывать изменения ее качественного и количественного состава, появление несвойственных ему видов бактерий, количественную обсемененность биоматериала.
Так, например, при бактериологическом исследовании мочи степень бактериурии (число бактерий в 1 мл мочи), равная и выше 105, свидетельствует об инфекции мочевых путей. Более низкая степень бактериурии встречается у здоровых людей и является следствием загрязнения мочи естественной микрофлорой мочевых путей.
Установить этиологическую роль условно-патогенной микрофлоры помогают также нарастание количества и повторность выделения бактерий одного вида от больного в процессе заболевания.
Врач-клиницист должен знать, что положительный результат бактериологического исследования в отношении биологического материала, полученного из в норме стерильного очага (кровь, плевральная жидкость, спинномозговая жидкость, пунктат органа или ткани), всегда тревожный результат, требующий немедленных действий по оказанию медицинской помощи.
Серологические методы исследования
В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела. Серологические реакции используются в двух направлениях.
1. Обнаружение с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого. В этом случае из двух компонентов реакции (антитело, антиген) неизвестным является сыворотка крови, так как постановка реакции проводится с заведомо известными антигенами.
Положительный результат реакции свидетельствует о наличии в крови антител, гомологичных применяемому антигену; отрицательный результат указывает на отсутствие таковых. Достоверные результаты получают при исследовании «парных» сывороток крови больного, взятой в начале заболевания (3-7-й день) и через 10-12 дней. В этом случае удается наблюдать динамику нарастания антител.
При вирусных инфекциях лишь четырехкратное и большее повышение титра антител во второй сыворотке имеет диагностическое значение.
С внедрением в практику лабораторий метода иммуноферментного анализа (ИФА) стало возможным определять в крови больных антитела, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов (IgM и IgG), что существенным образом повысило информативность серологических методов диагностики.
При первичном иммунном ответе, когда иммунная система человека взаимодействует с инфекционным агентом в первый раз, синтезируются преимущественно антитела, относящиеся к иммуноглобулинам класса М. Лишь позднее, на 8-12 день после попадания антигена в организм, в крови начинают накапливаться антитела иммуноглобулинов класса G.
При иммунном ответе на инфекционные агенты вырабатываются также и антитела класса А (IgA), которые играют важную роль в защите от инфекционных агентов кожи и слизистых оболочек.
2. Установление родовой и видовой принадлежности микроба или вируса. В этом случае неизвестным компонентом реакции является антиген. Такое исследование требует постановки реакции с заведомо известными иммунными сыворотками.
Серологические исследования не обладают 100%-й чувствительностью и специфичностью в отношении диагностики инфекционных заболеваний, могут давать перекрестные реакции с антителами, направленными к антигенам других возбудителей.
В связи с этим оценивать результаты серологических исследований необходимо с большой осторожностью и учетом клинической картины заболевания.
Именно этим обусловлено использование для диагностики одной инфекции множества тестов, а также применение метода Western-blot для подтверждения результатов скрининговых методов.
В последние годы прогресс в области серологических исследований связан с разработкой тест-систем для определения авидности специфических антител к возбудителям различных инфекционных заболеваний.
Авидность — характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами.
В ходе иммунного ответа организма на проникновение инфекционного агента стимулированный клон лимфоцитов начинает вырабатывать сначала специфические IgM-антитела, а несколько позже и специфические IgG-антитела.
IgG-антитела обладают поначалу низкой авидностью, то есть достаточно слабо связывают антиген.
Затем развитие иммунного процесса постепенно (это могут быть недели или месяцы) идет в сторону синтеза лимфоцитами высокоспецифичных (высокоавидных) IgG-антител, более прочно связывающихся с соответствующими антигенами. На основании этих закономерностей иммунного ответа организма в настоящее время разработаны тест-системы для определения авидности специфических IgG-антител при различных инфекционных заболеваниях.
Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование и тем самым с помощью серологических методов установить период инфицирования пациента.
В клинической практике наиболее широкое распространение нашло определение авидности антител класса IgG при токсоплазмозе и цитомегаловирусной инфекции, что дает дополнительную информацию, полезную в диагностическом и прогностическом плане при подозрении на эти инфекции, в особенности при беременности или планировании беременности.
Метод полимеразной цепной реакции
Полимеразная цепная реакция (ПЦР), являющаяся одним из методов ДНК-диагностики, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Тестируемый специфический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать.
Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНК-праймеров (последовательность нуклеотидов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, то есть одной бактерии или вирусной частицы.
Введение в реакцию дополнительного этапа — синтеза ДНК на молекуле РНК при помощи фермента обратной транскриптазы — позволило тестировать РНК-вирусы, например, вирус гепатита С. ПЦР — это трехступенчатый процесс, повторяющийся циклично: денатурация, отжиг праймеров, синтез ДНК (полимеризация). Синтезированное количество ДНК идентифицируют методом иммуноферментного анализа или электрофореза.
В ПЦР может быть использован различный биологический материал — сыворотка или плазма крови, соскоб из уретры, биоптат, плевральная или спинномозговая жидкость и т.д.
В первую очередь ЦПР применяют для диагностики инфекционных болезней, таких как вирусные гепатиты В, С, D, цитомегаловирусная инфекция, инфекционные заболевания, передающиеся половым путем (гонорея, хламидийная, микоплазменная, уреаплазменная инфекции), туберкулез, ВИЧ-инфекция и т.д.
Преимущества ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний перед другими методами исследований заключаются в следующем:
- возбудитель инфекции может быть обнаружен в любой биологической среде организма, в том числе и материале, получаемом при биопсии;
- возможна диагностика инфекционных болезней на самых ранних стадиях заболевания;
- возможность количественной оценки результатов исследований (сколько вирусов или бактерий содержится в исследуемом материале);
- высокая чувствительность метода; например, чувствительность ПЦР для выявления ДНК вируса гепатита В в крови составляет 0,001 пг/мл (приблизительно 4,0.102 копий/мл), в то время как метода гибридизации ДНК с использованием разветвленных зондов — 2,1 пг/мл (приблизительно 7,0.105 копий/мл).